我们的产品Cell Counting Kit-8(CCK-8)相比以前的方法为细胞数测定和细胞增殖/毒性检测提供了更方便和灵敏的方法。试剂盒使用了一种高水溶性的四唑盐,WST-8,它在电子耦合试剂存在下还原产生水溶性formazan形式的染料。由脱氢酶产生的formazan的量与活细胞的数量呈直接的线的检测灵敏度高于其他方法,如MTT,XTT,MTS或WST-1等。

  A:对于贴壁细胞,每孔至少需要1000个细胞(100 μl培养基)。对于白细胞,由于灵敏度较低,每孔至少需要2500个细胞(100 μl培养基)。推荐的96孔板每孔最大细胞数为25000。如果使用24孔或6孔板进行该检测,请计算相应的每孔的细胞数,并调整CCK-8的体积,使其为每孔总液体体积的10%。

  A:CCK-8的毒性非常低,在CCK-8测定完成后,相同的细胞可用于其他细胞增殖测定,例如结晶紫测定,中性红测定或DNA荧光测定。(除非细胞极为稀少,不推荐把CCK-8测定过的细胞用于其它实验。)

  A:在不含有细胞的培养基中加入CCK-8,酶标仪检测450 nm的吸光度;若做药物刺激实验,可在不含细胞、含药物的培养基中加入CCK-8。酶标仪检测450 nm的吸光度作为空白对照。

  A:CCK-8不能用于细胞染色,CCK-8检测原理是高水溶性的四唑盐WST-8在电子耦合试剂存在下还原产生水溶性formazan形式的染料,WST-8及formazan是高度水溶性的,不会进入细胞内对细胞进行染色。

  A:如果您没有450 nm滤光片。您也可以使用吸光度在430 nm和490 nm之间的滤光片, 450 nm滤光片具有最佳灵敏度。

  A:WST-8可能与还原剂反应生成WST-8 formazan,如果使用还原剂(例如一些抗氧化剂)会增加OD值;若存在氧化性物质则会CCK-8测定反应,减小OD值;此外,培养基中的酚红不会影响实验结果,酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。

  A:如果药物有还原性,则会与CCK-8发生反应,影响吸光度;药物中金属离子的存在可能会影响CCK-8的灵敏度。终浓度为1 mM 的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会5% 、15% 、90%的显色反应,使灵敏度降低。如果终浓度是10 mM 的线)Q:如果吸光度值太低,可以采取什么办法?

      和记娱乐,和记h88,h88平台官网

2020年07月10日 发布人:和记娱乐 来源:h88平台官网

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

添加时间:

网站地图